MAPs
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多重抗原肽(Multiple-Antigen peptide, MAP)又称抗原分支肽,是以赖氨酸的α-或ε-氨基为反应位点形成支架,以多拷贝的肽抗原作为外表层的分枝状合成多肽。根据赖氨酸的数目,可以合成不同数目侧链的多肽抗原,可设计2分支,3分支,4分支,5分支,6分支,7分支,8分支等不同的分支多肽,这样不必将抗原偶联到KLH等载体蛋白上就可以产生高滴度,高亲和力的抗体。多重抗原肽是生产高效价的抗多肽抗体和多肽疫苗的一种有效的方法。
通常,抗原的大小要求≥10,000 Da。此外,对于序列中含有>20个氨基酸的多肽,推荐使用4-分支的MAPs,对于序列中含有≤15个氨基酸的多肽,推荐使用8-分支的MAPs。
MAPs可以通过标准的固相多肽合成法(SPPS)来合成。这个流程包括将Fmoc-Lys(Fmoc)-OH缩合到树脂上,Fmoc脱保护处理,缩合,已经重复脱保护,偶联这些步骤。
在自然界中,没有发现有分支的多肽或者蛋白。但是,MAPs多肽的合成有时候会遇到一些问题。每个分支多肽之间很近的空间距离有可能导致多肽之间的聚集,这个有可能会导致多肽缩合效率降低。肽研生物在MAPs合成方面具有丰富的经验,可以提供从2分支,3分支,4分支,5分支,6分支,7分支,8分支等不同的分支多肽。
多重抗原肽的主要应用概述
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药物和基因传递;
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抗病毒剂;
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疫苗–MAPs可作为抗传染病(细菌、病毒甚至寄生虫)疫苗的蛋白模拟物,其中多抗原反应可显著增强病原体的清除;
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生物传感器或诊断试剂–在特异性和安全性方面,MAPs分别优于非分支肽或无活性病毒,使其适用于检测低特异性抗体,如在初次免疫反应中产生的抗体。
MAPs和载体蛋白偶联多肽优点对比
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四条或者八条多肽被连接到赖氨酸的侧链,所以MAPs类似于大蛋白。
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MAP多肽可以跟佐剂一起直接被注射来产生抗体,不需要载体蛋白
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MAP合成技术因为是通过C端连接的,所以更偏爱N-端或者内部多肽;相反KLH-偶联技术偏爱C-端多肽,然而,KLH载体可能会引起空间位阻。
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因为结构原因,MAP多肽可能在效价上比KLH偶联多肽要稍微高一些。MAP多肽将抗原浓缩度最大化了,最后得到的抗原含量可能占到最终产品中重量的95%。
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MAP多肽在免疫实验室,每次的用量都可以精确计算,对实验条件具有更高的可控性。
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