1. 简介与适用范围

本说明书旨在为科研人员及企业客户提供清晰、可复现的多肽合成与后处理指导。适用范围包括但不限于：短肽（2–30 aa）与中长肽（30–70 aa）的固相肽合成（SPPS）、肽段拼接、简单化学修饰（N-端乙酰化、C-端酰胺化）、氨基酸侧链修饰与标记（荧光、双功能交联基等）。

关键关键词（便于百度检索）：多肽合成、固相肽合成（SPPS）、定制肽、肽纯化、肽质量控制、南京肽研生物生物科技。

2. 所需试剂与材料

主要材料

• 合成树脂（Rink Amide、Wang、Tentagel 等，根据目的端确定）
• 保护氨基酸（Fmoc-或Boc-保护策略，常用为Fmoc）
• 耦合试剂（HBTU/HATU/EDC/HOBt 或 DIC/Oxyma 等）
• 脱保护试剂（20%哌啶/DMF 用于 Fmoc 脱保护）
• 溶剂（DMF、DCM、NMP、MeOH、乙腈等）
• 洗脱/裂解混合物（TFA、三异丙基硅烷、蒸馏水等）

质控与表征用试剂/耗材

• 反相高效液相色谱（RP-HPLC）耗材（C18柱）
• 质谱（ESI-MS, MALDI-TOF）样品溶剂
• 滴定/浓度测定试剂（UV 分光光度计、BCA/Bradford 等如需）

3. 合成流程（步骤详解）

3.1 设计与序列确认

在合成前，请向我们提供肽序列（一-letter codes）、所需修饰、末端形式（C-末端酰胺或酸）、纯度要求（例如 ≥95%）、目标产量（mg 或 g）、以及是否需要标签或同位素标记。

3.2 固相合成（典型 Fmoc-SPPS）

1. 树脂准备：称取适量树脂并溶胀（一般在 DCM 或 DMF 中充分溶胀 30–60 分钟）。
2. 首位氨基酸接枝：将首位氨基酸耦合至树脂（若为 Rink Amide 则得到酰胺化 C 端）。
3. 循环合成：耦合 → 洗涤 → 脱保护 → 洗涤。常规耦合条件：Fmoc-AA（3–5 eq） + HBTU/HATU（3–5 eq） + DIEA（6–10 eq）或 DIC/Oxyma 替代方案。
4. 必要时做双次耦合或延长耦合时间，特别是对于难耦合的氨基酸（如脯氨酸、富疏水段或带大量二级氨基的片段）。
5. 完成序列后：Fmoc 脱保护并进行最终洗涤。

3.3 裂解与侧链脱保护

常用裂解液：TFA/TIS/H₂O（95:2.5:2.5）或针对特殊修饰调整的裂解体系；裂解时间常为 1.5–3 小时（视保护基团与修饰而定）。裂解后用冷乙醚沉淀肽并离心回收。

3.4 纯化（RP-HPLC）

将粗品溶于适当的溶剂（一般为水/乙腈 + 0.1% TFA），使用 C18 反相柱进行梯度洗脱（例如 5%→60% 乙腈，30–60 分钟），收集目标峰并合并，冻干得纯品。

3.5 质谱鉴定与纯度检测

使用 ESI-MS 或 MALDI-TOF 进行分子量确认；使用 RP-HPLC（220 nm/214 nm）测定纯度并出具纯度报告图谱。

3.6 修饰与标记（如需）

可在固相或溶液相完成生物素化、荧光素（FITC）、Cys-交联、PEG 化等。请在下单时注明修饰位点与保护策略。

4. 质量控制（QC）

我方按客户需求提供以下 QC 报告（可作为交付凭证）：

• RP-HPLC 色谱图（原始数据与整合表）；
• MALDI-TOF 或 ESI-MS 质谱图；
• 必要时提供氨基酸分析（AA analysis）或 NMR（针对复杂修饰）；
• 纯度目标与容差说明（例如：报告纯度 ≥ 95%；若低于此值，需客户确认是否继续交付或返工）。

质量判定示例

5. 纯品处理、储存与运输

5.1 冻干与包装

我们通常将纯品冻干后以铝箔袋或螺旋管封装，标注批号、序列、纯度与保存条件。

5.2 储存条件

• 短期（≤1 个月）：4°C 干燥避光保存；
• 长期（>1 个月）：-20°C 或 -80°C 保存分装；
• 溶液状态：建议分装后低温保存且避免反复冻融。

5.3 运输建议

根据目的地和交付时间，选择常温/冷链（冰袋或干冰）运输，并在快递单与包装上清楚标注保存要求。对国际运输，遵守相关法规与报关文件要求。

6. 安全与废弃物处理

注意：实验操作涉及强酸、强碱、有机溶剂与挥发性试剂，务必在合规实验室由受训人员操作，遵守本地化学品安全法规与实验室生物安全规范。

• 操作时佩戴个人防护装备（PPE）：实验服、护目镜、耐化学手套等。
• 有机溶剂废液集中回收，酸碱中和后按规定处置。
• 裂解液与含 TFA 污染物按危险化学品处置流程处理。

7. 常见问题（FAQ）

问：最短合成交期是多少？

答：常规短肽（≤15 aa）一般 5–7 个工作日（不含纯化和 QC 的时间）；具体交期视序列复杂度与纯度要求而定。

问：你们能做同位素标记 / 荧光标记吗？

答：可以；请在下单时注明标记类型与位点，我们将评估可行性并报价。

问：能否提供批量生产？

答：支持从 mg 级到 g 级的制备与中小批量生产，量产需求请直接联系以获取 GMP 合作与报价。

8. 联系与下单

如需下单或获取技术支持，请通过以下方式联系：

• 在线下单页面：https://www.typeptide.com/

下单请提供：肽序列、所需修饰、纯度要求、目标产量、交付期限与发票信息（便于我们快速生成报价单）。